一、什么是非洲猪瘟
非洲猪瘟(African swine fever, ASF)是由非洲猪瘟病毒(ASFV)引起猪的一种急性、热性、高度接触性动物传染病,临床上以高热、网状内皮系统出血和高死亡率为特征,易感猪群的病死率高达100%。世界动物卫生组织(OIE)将其列为法定报告动物疫病,我国将其列为一类动物疫病。目前,针对非洲猪瘟防控,尚无有效的商品化疫苗,防控重点是做好生物安全管理和早期诊断扑杀净化。
二、非洲猪瘟感染规律
源于:《FAO动物生产与卫生手册——非洲猪瘟:发现与诊断》
ASF自然感染潜伏期为4-19天。
最急性和急性感染通常在4-10天死亡。
在临床症状出现的2天前,ASF感染动物开始散播大量病毒。
感染后7-9天血清转阳,抗体持续很长时间,可持续终生。
四、非洲猪瘟检测实验室建设方案
用于非洲猪瘟病毒检测的实验室,推荐配置以下实验室设备:II级生物安全柜、混匀仪(涡旋振荡器)、高速离心机、金属浴或恒温水浴锅、组织破碎仪(均质器/匀浆仪)、移液器、冷藏冷冻冰箱、高压灭菌锅。同时,建议实验室配备合适的个人防护用品,如防护服、手套、口罩等。
1. II级生物安全柜:提供无菌环境用于处理组织样品等(避免外部环境污染样品),同时保证病毒不向实验室环境扩散(保证人员和环境安全)。
2.高速离心机:用于血清的分离和样品的处理的分离。
3. 金属浴或恒温水浴锅:提供恒温环境,用于样品处理过程中的裂解过程。建议选择带有震荡功能的设备,或者配备单独的混匀仪(涡旋振荡器)。
4.组织破碎仪(均质器/匀浆仪):根据样品类型选择便携式组织破碎仪或者高通量组织破碎仪等(在用组织检测时使用)。
5. 移液器:用于实验过程中的微量体积加样。
6.冷藏冷冻冰箱:用于样品、试剂盒试纸等储存,建议定期监测冰箱温度。
7.高压灭菌器:用于实验结束后样品及用具的灭菌处理,避免样品带有病毒时泄露导致疫情扩散。
非洲猪瘟检测实验室仪器方案 | ||||
序号 | 仪器名称 | 数量 | 型号 | 品牌 |
1 | 全自动高压灭菌锅 | 1台 | SQ510C | 雅马拓YAMATO |
2 | 生物安全柜 | 2台 | HR40-IIA2 | 青岛海尔生物医疗 |
3 | 超净工作台 | 1台 | HCB-1300V | 青岛海尔生物医疗 |
4 | 超低温冰箱 | 1台 | DW-86L338J | 青岛海尔生物医疗 |
5 | 医用冷藏箱 | 1台 | HYC-290 | 青岛海尔生物医疗 |
6 | 移液器/移液枪排 | 若干 | 852/853系列 | 瑞士SOCOREX |
7 | 离心机 | 1台 | FC5515R | 美国奥豪斯 |
8 | 生化培养箱 | 1台 | IN612C | 雅马拓YAMATO |
9 | 酶标仪 | 1台 | RT6100 | 雷杜 |
10 | 洗板机 | 1台 | RT3100 | 雷杜 |
11 | 荧光定量PCR仪 | 1台 | Line-Gene 9600 Plus | 博日 |
12 | 核酸提取仪 | 1台 | GenePure Plus | 博日 |
13 | 电热恒温培养箱 | 1台 | IC412C | 雅马拓YAMATO |
14 | 液氮罐 | 1台 | YDS-10 | 青岛海尔生物医疗 |
15 | 纯水机 | 1台 | ZWM-HLPA1-10 | 中沃水务 |
16 | 电子天平 | 1台 | AX224ZH/E | 美国奥豪斯 |
17 | 二氧化碳培养箱 | 1台 | BNA610 | 雅马拓YAMATO |
18 | 水浴锅 | 1台 | 双列四孔 | 北京 |
19 | 超声波清洗器 | 1台 | KQ3200B | 昆山 |
20 | 涡旋振荡器 | 1台 | VXMNAL | 美国奥豪斯 |
21 | 磁力搅拌器 | 1台 | WH220 | 维根斯 |
22 | 洗眼器 | 2台 | YQC000979 | 国产 |
23 | 生物显微镜 | 1台 | CX23 | 奥林巴斯 |
24 | 掌上离心机 | 1台 | FC5306 | 美国奥豪斯 |
25 | 移动紫外线灯 | 1台 | YTY-05 | 国产 |
26 | 组织研磨仪 | 1台 | Ts-24 | 净信等 |
27 | 电泳仪 | 1台 | 待选 | 六一等 |
28 | PH计 | 1台 | ST3100 | 美国奥豪斯 |
28 | 耗材 | 若干 | 询问湖南弘林仪器 | 采血管采血针、手套,口罩,白大褂,mark笔、病毒提取试剂盒,非洲猪瘟检测试剂盒 |